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一種高效的萊茵衣藻電轉(zhuǎn)化方法

劉佳; 何炫程; 項(xiàng)晨; 馬伯寧; 韋航濤; 楊明峰 北京農(nóng)學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院; 農(nóng)業(yè)部華北都市農(nóng)業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京102206

關(guān)鍵詞:萊茵衣藻 電轉(zhuǎn)化 融合基因 綠色熒光蛋白 巴龍霉素 

摘要:【目的】為了探明萊茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii最佳的轉(zhuǎn)化條件。【方法】將融合基因4CL-3a-STS與綠色熒光蛋白(GFP)分別作為目的基因,以aphⅧ為抗性基因,采用電轉(zhuǎn)化法將兩種目的基因分別轉(zhuǎn)入野生型(WT)萊茵衣藻和細(xì)胞壁缺失型萊茵衣藻(CC425)中。【結(jié)果】用巴龍霉素抗性篩選以及通過PCR驗(yàn)證與熒光共聚焦顯微鏡檢測(cè),證實(shí)目的基因在兩種萊茵衣藻中成功表達(dá)。【結(jié)論】獲得了一種高效的萊茵衣藻電轉(zhuǎn)化方法,野生型衣藻轉(zhuǎn)化率為11.07%,細(xì)胞壁缺失型衣藻轉(zhuǎn)化率為49.67%。

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