關鍵詞：皺紋盤鮑 硫氧還蛋白過氧化物酶 畢赤酵母 抗氧化 

摘要：為研究皺紋盤鮑Haliotis discus hannai Ino硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX2)蛋白的抗氧化活性,將HdhTPX2基因克隆至pPIC9K載體,通過電擊轉化至畢赤酵母GS115菌株中,獲得重組表達質粒pPIC9K-HdhTPX2,經(jīng)甲醇誘導及親和層析純化得到重組HdhTPX2蛋白,并進行質譜鑒定及體外抗氧化功能檢測。結果表明:本研究中成功構建了重組畢赤酵母菌株GS115/pPIC9K-HdhTPX2,經(jīng)表達條件的優(yōu)化,在pH為7的培養(yǎng)基中用0.5%甲醇誘導表達72 h,分泌表達上清液中得到相對分子質量約為25 000的穩(wěn)定表達產(chǎn)物,純化后的蛋白經(jīng)質譜鑒定為目的蛋白;體外活性測定發(fā)現(xiàn),該蛋白清除羥自由基(·OH)能力強于維生素C,并對H2O2引起的細胞損傷具有一定的保護作用。研究表明,皺紋盤鮑硫氧還蛋白過氧化物酶HdhTPX2在畢赤酵母表達系統(tǒng)中得到高效表達,重組表達產(chǎn)物具有抗氧化活性功能。

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