關鍵詞：須糖多孢菌 padr 轉錄調控因子 轉運蛋白 丁烯基多殺菌素 

摘要：為研究padR基因表達對須糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次級代謝產物生物合成及相關蛋白表達的影響,在對須糖多孢菌基因組測序結果的基礎上,從基因組中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR將硫鏈絲菌素抗性基因插入上、下游同源臂之間,將融合片段與穿梭載體pOJ260連接,構建敲除載體pOJ260-UHA-tsr-DHA。通過接合轉移將其導入野生型須糖多孢菌中,通過同源臂雙交換獲得須糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。經HPLC檢測分析,敲除菌株次級代謝產物丁烯基多殺菌素產量與原始菌株相比提高了27.3%,且有7個轉運相關蛋白出現表達上調。這一研究表明padR基因的敲除能夠有效促進須糖多孢菌丁烯基多殺菌素的生物合成。該研究對優化須糖多孢菌丁烯基多殺菌素的生物合成途徑具有一定的指導意義,為研究padR基因表達在鏈霉菌次級代謝產物合成中的作用打下了基礎。

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