關(guān)鍵詞：c2c12細(xì)胞 成肌分化 e2f3 

摘要：為探究miR-106a-5p對(duì)成肌分化的作用及潛在調(diào)控靶點(diǎn),在線預(yù)測(cè)miR-106a-5p潛在靶基因,通過(guò)RT-qPCR及Westernblot檢測(cè)miR-106a-5p對(duì)靶基因的調(diào)控作用,利用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)驗(yàn)證miR-106a-5p與靶基因之間的互作,并以C2C12細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?采用過(guò)表達(dá)技術(shù),在細(xì)胞形態(tài)學(xué)水平初步探索其對(duì)成肌分化的作用。在線預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)E2F3和SP-1可能是miR-106a-5p的潛在靶基因;RT-qPCR分析表明,miR-106a-5p與E2F3和SP-1的表達(dá)模式相反;Westernblots結(jié)果發(fā)現(xiàn),miR-106a-5p抑制E2F3和SP-1蛋白翻譯;雙熒光素酶報(bào)告載體系統(tǒng)表明,E2F3和SP-1是miR-106a-5p調(diào)控成肌分化的靶基因;此外,超表達(dá)miR-106a-5p抑制C2C12細(xì)胞分化,肌管數(shù)目顯著減少。結(jié)果表明,E2F3和SP-1是miR-106a-5p抑制C2C12細(xì)胞成肌分化的靶基因。

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