關(guān)鍵詞：體細(xì)胞核移植 卵泡抑制素 骨骼肌特異表達載體 肌肉 轉(zhuǎn)fst基因絨山羊 

摘要：高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)肉用家畜新品種的培育是家畜育種的工作目標(biāo)之一,體細(xì)胞核移植技術(shù)和基因編輯技術(shù)的發(fā)展為新品種家畜的培育提供了快速便捷的新方式.本研究將骨骼肌特異表達卵泡抑制素(Follistatin,FST)的pCDsRed2-SP-FST重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染山羊胎兒成纖維細(xì)胞,通過G418篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的陽性供體細(xì)胞系,將供體細(xì)胞注入去核成熟卵母細(xì)胞獲得FST基因編輯重構(gòu)胚胎425個,胚胎移植到59個受體母羊,出生羔羊4只,其中1只羔羊存活至今.利用PCR、Southern Blot、Western Blot和qPCR等技術(shù)在分子生物學(xué)水平鑒定該羊羔,發(fā)現(xiàn)FST基因被成功插入到山羊基因組中并可在肌肉組織中過表達,而且FST基因的過表達可使肌肉標(biāo)志基因MSTN和BMP4的表達增強.羔羊健康分析表明轉(zhuǎn)FST基因絨山羊各項生理指標(biāo)與野生型相比并無明顯差異,但FST基因的過表達增加了肌纖維的直徑和密度.該FST基因過表達絨山羊的成功獲得為高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)肉用家畜新品種的培育奠定了研究基礎(chǔ).

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