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慢病毒介導RNA干擾沉默OPN基因抑制低氧引起的SD大鼠肺動脈血管平滑肌細胞增殖

劉川川; 劉輝琦; 曹學鋒; 劉杰; 吳穹; 王生蘭 青海大學醫學院; 青海西寧810001

關鍵詞:rna干擾 低氧 骨橋蛋白 肺動脈平滑肌細胞 

摘要:目的觀察慢病毒介導RNA干擾沉默骨橋蛋白(Osteopontin,OPN)基因對低氧刺激下SD大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖的影響。方法SD大鼠肺動脈平滑肌細胞分為四組:常氧對照組、低氧對照組、低氧+空病毒組、低氧+OPN沉默組,分別采用MTY法檢測各組細胞的增殖能力,實時熒光定量法檢測各組細胞OPNmRNA的表達情況,WesternBlotting法檢測各組細胞OPN蛋白表達水平。結果2%低氧環境培養PASMCs細胞48h,可使OPN的mRNA和蛋白表達量較常氧對照組增高,細胞增殖能力增強,差異有顯著性(P〈0.05);肺動脈平滑肌細胞慢病毒感染72h后低氧培養48h,可使OPNmRNA相對表達量和蛋白表達量均低于低氧對照組和低氧+空病毒組,且細胞的增殖能力降低,差異有顯著性(P〈0.05)。結論低氧刺激可使OPN表達量增加、肺動脈平滑肌細胞增殖;慢病毒介導RNA干擾沉默OPN基因可抑制低氧刺激引起的大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖。

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