關鍵詞：谷氨酸棒狀桿菌 回補途徑 代謝工程 

摘要：該實驗考察和比較增強回補途徑對谷氨酸棒狀桿菌合成L-異亮氨酸的影響。通過以L-異亮氨酸生產菌Corynebacterium glutamicum YI為出發菌株,分別采用基因組整合和質粒的方式過表達磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶編碼基因ppc及丙酮酸羧化酶編碼基因pyc。結果表明,獲得pyc基因組整合和質粒過表達菌株ILE01和ILE02,搖瓶條件下菌株L-異亮氨酸產量分別提高17.3%(6.1 g/L)和9.6%(5.7 g/L)、發酵罐條件下分別提高11.7%(24.8 g/L)和8.1%(24.0 g/L)。獲得ppc基因組整合和質粒過表達菌株ILE03和ILE04,搖瓶條件下菌株L-異亮氨酸產量分別提高30.8%(6.8 g/L)和13.5%(5.9 g/L)、發酵罐條件下分別提高15.8%(25.7 g/L)和9.5%(24.3 g/L)。此外,過表達pyc和ppc還可不同程度地提高L-異亮氨酸轉化率。然而采用質粒過表達pyc和ppc均使得菌株生物量下降。因此,過表達pyc和ppc均能顯著提高L-異亮氨酸產量和轉化率,基因組整合的過表達方式效果優于質粒過表達。該研究首次比較并報道了增強谷氨酸棒桿菌回補途徑對谷氨酸棒桿菌生產L-異亮氨酸的影響,可為其代謝工程改造提供參考。

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