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受miRNA-205調控的重組柯薩奇病毒B3的構建及其復制

戴瀟逸; 鐘江 復旦大學生命科學學院微生物學與微生物工程系; 上海200438

關鍵詞:柯薩奇病毒b3 感染性克隆載體 細胞趨性 

摘要:本研究在柯薩奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)基因組P1編碼區與P2編碼區之間插入一段has-miRNA-205-3p和has-miRNA-205-5p(簡稱miR-205)的靶序列,得到重組病毒v205T,并比較分析了它在人宮頸癌細胞系HeLa細胞(miR-205低水平表達)和非小細胞肺癌細胞系A549細胞(miR-205高水平表達)中的復制情況。結果表明,插入的miR-205靶序列不影響病毒在HeLa細胞中的復制水平,但抑制了病毒在A549細胞中的復制,病毒滴度為對照的1%以下。為探討v205T在2株細胞中復制差異的原因,進一步加入miR-205的類似物和抑制物。miR-205類似物可抑制v205T在HeLa細胞中復制和殺傷細胞的水平,而miR-205抑制物可提高v205T在A549細胞中的復制和殺傷細胞的水平。結果表明,v205T的復制確實受miR-205的調控。本研究為開發基于CVB3載體的溶瘤病毒和針對CVB3的減毒活疫苗提供了依據。

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