關(guān)鍵詞：細(xì)胞凋亡 stattic 

摘要：目的觀察信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)抑制劑Stattic對THP-1細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素8(IL-8)和細(xì)胞凋亡的影響,并探討其機制。方法采用(0、1、5、10、15、20)μmol/L Stattic處理THP-1細(xì)胞0、1、3、6、12、24h,實時熒光定量PCR檢測細(xì)胞IL-8、IL-6、IL-1β、腫瘤壞死因子α(TNF-α)的mRNA水平,ELISA檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液IL-8蛋白水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測THP-1細(xì)胞的凋亡,Western blot法檢測細(xì)胞STAT3、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)的蛋白磷酸化水平;采用(0、1、5、10)μmol/L的ERK通路選擇性抑制劑U0126預(yù)處理THP-1細(xì)胞,反轉(zhuǎn)錄PCR檢測U0126對Stattic誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞表達IL-8 mRNA水平的影響。結(jié)果(10~20)μmol/LStattic顯著上調(diào)IL-8在THP-1細(xì)胞中的mRNA和蛋白表達,僅(15、20)μmol/LStattic能誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡;Stattic處理THP-1細(xì)胞1、3、6、12、24 h,均顯著上調(diào)IL-8的mRNA水平,以3 h時最為明顯,在6 h以后呈時間依賴性上調(diào)IL-8的蛋白水平并誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡;Stattic呈濃度和時間依賴性抑制STAT3磷酸化,時間依賴性地誘導(dǎo)ERK磷酸化,在(1、5、10、15、20)μmol/L時均顯著誘導(dǎo)ERK磷酸化。另外,U0126顯著抑制Stattic誘導(dǎo)的IL-8 mRNA表達。結(jié)論STAT3抑制劑Stattic通過激活ERK信號通路誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡和IL-8產(chǎn)生。

細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志要求:

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