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大腸桿菌O157:H7熒光納米顆粒試紙條的研制

范放 朱海 洪小柳 黃李華 劉慧玲 馬淑棉 宋志強 深圳出入境檢驗檢疫局食檢中心 深圳518067

關鍵詞:螯合物 納米顆粒 免疫層析試紙條 

摘要:建立大腸桿菌O157:H7熒光納米顆粒免疫層析法。方法:首先將熒光納米顆粒與大腸桿菌O157:H7單抗共價偶聯,制成大腸桿菌O157:H7單抗-熒光納米顆粒偶聯物。用該偶聯物代替金標顆粒,以雙抗體夾心作為反應模式來制備大腸桿菌O157:H7免疫層析試紙條。在紫外燈下觀察免疫層析試紙條上經免疫反應而產生的質控線和檢測線上的熒光信號,并利用熒光強度來半定量檢測大腸桿菌O157:H7。結果:用所制備的試紙條對11屬24種54株菌進行檢測,所有27株大腸桿菌O157:H7的檢測結果呈陽性.其它非大腸桿菌O157菌株檢測結果呈陰性。用該試紙條檢測人工污染的雞肉樣品。靈敏度為2.7×10^4CFU/mL。通過觀察檢測線的有無。可對大腸桿菌O157:H7進行半定量檢測。分別用所制備的大腸桿菌O157:H7免疫層析試紙條和標準法檢測57份樣品,2種方法的總符合率為80.7%。結論:大腸桿菌O157:H7熒光納米顆粒檢測試紙條的研制成功,為大腸桿菌O157:H7的快速檢測提供了一個極好的檢測方法.便于野外檢測的開展.具有廣闊的應用前景。

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