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埃可病毒6型對恒河猴樹突狀細胞的感染研究

曾潔媛; 楊盛然; 李琦涵; 王建斌; 王晶晶; 張小龍; 范勝濤; 馮敏; 廖蕓; 王麗春; 蔣國潤; 楊少杰; 余波; 張瑩 昆明醫科大學; 昆明650500; 中國醫學科學院&北京協和醫學院醫學生物學研究所; 昆明650118; 云南省科學技術院; 昆明650051

關鍵詞:埃可病毒6型 樹突狀細胞 感染 腸道病毒 腫瘤壞死因子 

摘要:目的:腸道病毒作為小核糖核酸病毒的成員之一,其病原特性已得到了廣泛的研究,為進一步探討其尚未完全清楚的病理學機理,利用來源于恒河猴的不同免疫細胞,對埃可病毒6型(Echovirus 6,Echo 6)毒株與樹突狀細胞的作用關系及其特征做了初步分析。方法:利用流式細胞儀及抗不同樹突狀細胞表面特征分子的抗體,從恒河猴外周血及骨髓分離未成熟樹突狀細胞,經體外誘導培養后,以Echo 6病毒在感染復數為0.1的條件下感染樹突狀細胞,并于感染后不同時間點收集細胞,檢測病毒載量,繪制病毒增殖曲線,同時對上清中相關細胞因子含量做出動態檢測。結果:源于恒河猴外周血PBMC分選出的樹突狀細胞以成熟期樹突狀細胞(CD11~+/CD83~+)居多;而源于骨髓的細胞經粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和重組人白細胞介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)刺激培養后誘導分化的樹突狀細胞則以未成熟細胞為主。Echo 6型病毒分別對未成熟樹突狀細胞和成熟樹突狀細胞進行感染后顯示,病毒在未成熟樹突狀細胞中有明顯增殖的趨勢而非在成熟樹突狀細胞中增殖。進一步檢測病毒感染這些細胞后效應分子的表達情況發現,感染了Echo 6型病毒的未成熟樹突狀細胞出現腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)轉錄表達水平的明顯上升,同時這些細胞的表面標記呈現CD11~+/CD83~+趨勢。結論:Echo 6型病毒能夠感染未成熟樹突狀細胞并在其中出現明顯增殖趨勢,并在上調細胞TNF-α和rh IL-6表達水平的同時,促進這些細胞轉變為成熟樹突狀細胞。

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