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建立檢測瘧疾的微滴數字PCR方法

趙明惠; 吳健; 王寧; 韓穎; 劉偉; 徐鐵龍; 張強; 冉鑫 江西國際旅行衛生保健中心; 江西南昌330002; 廣東國際旅行衛生保健中心; 上海之江生物科技股份有限公司; 江西省疾病預防控制中心

關鍵詞:微滴數字pcr 瘧疾 數字pcr 熒光定量pcr 

摘要:目的建立適合口岸瘧疾檢測的微滴數字PCR方法。方法根據文獻中檢測瘧原蟲的特異性引物和探針,建立檢測瘧疾的微滴數字PCR方法,與普通PCR及熒光定量PCR進行比較,評估微滴數字PCR的優越性。結果微滴數字PCR檢測下限為0.721ng/μl,靈敏度比普通PCR高10倍,與熒光定量PCR相當;微滴數字PCR的重復性高于普通PCR,但不如熒光定量PCR穩定。檢測的準確性方面,普通PCR對37份已知樣本的檢測準確率為75.68%,微滴數字PCR和熒光定量PCR均能達到100.00%。結論建立了檢測瘧疾的微滴數字PCR方法,比普通PCR方法靈敏度、重復性及準確性均有很大優勢。

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