關鍵詞：人脂肪干細胞 外泌體 細胞外分泌物質 肝纖維化 肝星狀細胞 

摘要：背景:肝纖維化具有較高的發病率和死亡率,肝星狀細胞的活化和增殖是肝纖維化進程中的關鍵環節。目前還沒有針對單一環節或靶點的有效抗纖維化藥物。目的:分析人脂肪干細胞來源外泌體對四氯化碳誘導的大鼠肝纖維化的影響。方法:①通過酶溶解法獲取健康人群來源脂肪中干細胞,體外培養獲取一定數量細胞后通過多重超濾法獲取外泌體。體外培養的肝星狀細胞經轉化生長因子β1活化后利用不同濃度外泌體進行處理,通過定量PCR檢測細胞內α-平滑肌動蛋白的表達明確其活化程度,以及分別使用CCK-8及流式細胞術檢測各組外泌體處理后活化肝星狀細胞的生長率及凋亡率。②通過腹腔注射四氯化碳構建肝纖維化大鼠動物模型,尾靜脈注射外泌體進行治療。檢測各組動物的肝功能及血清Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原,肝組織Ishak評分及肝纖維化半定量,以及通過免疫熒光法檢測肝組織內基質金屬蛋白酶組織抑制劑1、基質金屬蛋白酶9及α-平滑肌動蛋白的表達。實驗方案于2017年1月經同濟大學動物實驗倫理委員會以及醫學倫理學委員會批準。結果與結論:人脂肪干細胞來源外泌體可抑制活化的肝星狀細胞增殖,其可能的機制為抑制活化巨噬細胞的增殖,減少膠原纖維、α-平滑肌動蛋白及基質金屬蛋白酶組織抑制劑1的表達,并促進基質金屬蛋白酶9的表達。提示外泌體可治療四氯化碳誘導肝纖維化。

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