胰島素促進(jìn)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞合成干細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

余盈娟 袁玉豐 林琳 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化科 210029

關(guān)鍵詞:胰島素 結(jié)腸 肌 平滑 干細(xì)胞因子 

摘要:目的探討胰島素(Ins)促進(jìn)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞(SMC)表達(dá)干細(xì)胞因子(SCF)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑。方法分離培養(yǎng)SD大鼠結(jié)腸SMC,采用a-actin免疫熒光鑒定。分3大組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。①I(mǎi)ns濃度梯度組:SMC添加不同濃度Ins(0、2.5、5、20、40和80mg/L),培養(yǎng)16h。②Ins時(shí)間梯度組:SMC+I(xiàn)ns(40mg/L),分別培養(yǎng)0、8、16和24h。③信號(hào)通路阻斷組:SMC加LY-294002或PD-98059預(yù)處理后,再予以40mg/L的Ins誘導(dǎo)16h。四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)結(jié)腸SMC增殖情況,Western印跡和反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)SCF的變化。結(jié)果①I(mǎi)ns在5mg/L濃度即能顯著促進(jìn)SMC增殖,其效應(yīng)與20、40和80mg/L時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均d0.05)。②與未添加Ins組(即空白對(duì)照組)比較,低中劑量Ins(2.5、5和20mg/L)即有促進(jìn)結(jié)腸SMC表達(dá)SCFmRNA和SCF蛋白的作用(P〈0.05),這種作用在Ins40mg/L時(shí)達(dá)到最大(P〈0.05),80mg/L時(shí)與40mg/L時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〉0.05)。③與0h時(shí)相比,40mg/L的Ins作用于SMC8h后SCF表達(dá)增加(P〈0.05),16h后達(dá)峰值(P〈0.05),24h與16h差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〉0.05)。④與空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組相比,LY-294002、PD-98059處理16h,均能減少I(mǎi)ns誘導(dǎo)的SCF的表達(dá)(P值均〈0.05)。結(jié)論Ins能促進(jìn)SMC增殖;在一定范圍內(nèi)呈劑量與時(shí)間依賴性誘導(dǎo)結(jié)腸SMC合成SCF,該效應(yīng)可能與PI3K與MAPK兩條信號(hào)通路有關(guān)。

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