關鍵詞：苦瓜枯萎病 尖孢鐮孢菌苦瓜專化型 分子檢測 

摘要：通過URP(Universal Rice Primers)-PCR分析尖孢鐮孢菌苦瓜專化型基因組DNA擴增片段多態性,篩選檢測尖孢鐮孢菌苦瓜專化型的特異性引物,并建立了基于該引物的PCR檢測方法。結果表明,特異性引物為FOMM-SPF/FOMMSPR,PCR檢測體系為25μL,包括2'Green Taq M aster Mix 12.5μL,10 mmol·L-1的上下游引物各1μL,模板DNA 1μL,滅菌去離子水補足至25μL;PCR程序為95℃預變性3 min,94℃變性15 s,57℃退火30 s,72℃延伸20 s,共30個循環,循環結束后72℃延伸5 min;特異性擴增片段大小294 bp,檢測靈敏度為2 ng·μL-1DNA或50個孢子·500 mg-1土壤。該引物及其檢測方法對尖孢鐮孢菌苦瓜專化型的檢測特異性好、靈敏度高,可以從土壤和植物樣品中快速準確地檢測出苦瓜枯萎病菌,無需病原菌的分離培養和致病性檢測,對苦瓜枯萎病的早期診斷和預警及有效防控具有重要的指導意義。

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